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細胞外泌體提取步驟

日期:2023-10-17 14:54:46

    提取細胞外泌體的步驟可以包括以下幾個關鍵的操作:
 
    細胞培養和收集:選擇合適的細胞株進行培養。當細胞生長到一定程度后,收集培養上清液并離心去除細胞碎片和殘留細胞。
 
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    預處理:對上清液進行預處理以去除細胞殘余物和大顆粒物質。可以通過低速離心(如300×g)去除大細胞碎片,然后再用高速離心(如2,000×g或10,000×g)去除細胞碎片、凝集物和大顆粒。
 
    超速離心:將預處理后的上清液進行超速離心,以沉淀細胞外泌體。通常使用高速離心(如100,000×g或更高速度)離心沉淀細胞外泌體。
 
    液體去除:去除上述步驟離心得到的沉淀,將剩余液體小心地抽取或排空,以避免干擾后續的操作。
 
    再懸浮與清洗:使用合適的緩沖液再懸浮細胞外泌體沉淀,然后再次進行離心。這個步驟可根據實驗需要重復進行,目的是去除潛在的污染物和離心殘留。
 
    冷凍保存或進一步處理:根據實驗需求,可以將提取得到的細胞外泌體冷凍保存或進一步進行分離、純化、分析等后續處理。
 
    細胞外泌體的提取步驟可能因研究目的、細胞類型、培養條件等因素而略有差異。