穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建服務(wù)
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建是指外源基因進入受體細胞并整合到細胞的染色體上，使目的抗原在宿主細胞膜表面進行長期穩(wěn)定的表達。穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株在生物學研究中扮演著非常重要的角色，廣泛用于重組蛋白和單克隆抗體生產(chǎn)、藥物篩選、基因功能研究等應用。
華美生物多年從事蛋白表達研究，具有大量穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株開發(fā)經(jīng)驗，能夠有效提高穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株的生產(chǎn)能力，改善實驗結(jié)果，為客戶提供過表達穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株和報告基因細胞株的從基因序列到穩(wěn)轉(zhuǎn)株交付的一站式服務(wù)。
指基于某一細胞系構(gòu)建的持續(xù)過表達或干擾某特定基因的細胞系，其特性在于它們能夠持續(xù)地表達特定的基因，而不是像瞬時轉(zhuǎn)染那樣只能短暫地表達。
應用領(lǐng)域：
- 基因功能研究
- 藥物篩選
- 疾病模型建立
- 小分子藥物和抗體藥開發(fā)
通過分子生物學克隆技術(shù)，將特定的報告基因（例如熒光素酶）插入到目標細胞的染色體中，經(jīng)過篩選培養(yǎng)，獲得能夠穩(wěn)定表達報告基因的細胞株。
應用領(lǐng)域：
- 基因表達調(diào)控研究
- ADCC/ADCP功能驗證
- 蛋白質(zhì)相互作用（信號通路）研究
- Cross-linking藥物評價
服務(wù)優(yōu)勢：
完善的服務(wù)平臺
具備完善的細胞、抗體、蛋白等服務(wù)平臺，能夠提供從穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建到重組蛋白生產(chǎn)等一站式技術(shù)服務(wù)
嚴格的質(zhì)控體系
雙重檢測細菌、支原體等微生物，100%確保無污染；進行細胞活率檢測，保證交付質(zhì)量
穩(wěn)定傳代
高質(zhì)量交付標準，保證穩(wěn)定性傳代>20代
專業(yè)技術(shù)支持
專業(yè)技術(shù)人員定期匯報項目進展，以保證項目順利推進
技術(shù)路線：
服務(wù)內(nèi)容及周期：
宿主細胞檢測（1-2周）
- 細胞存活率檢測；
- 細胞數(shù)量檢測；
- 細菌真菌檢測；
- 支原體檢測。
慢病毒表達質(zhì)粒構(gòu)建（2-3周）
- 密碼子優(yōu)化；
- 全基因合成；
- 構(gòu)建慢病毒表達質(zhì)粒。
慢病毒包裝（1-2周）
- 將表達質(zhì)粒和輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)宿主細胞，進行慢病毒包裝。
Cell Pool篩選及驗證（1-2周）
- 陽性細胞篩選；
- Cell pool表達量檢測。
單克隆篩選及驗證（2-3周）
- 單細胞進行鋪板，并驗證單克隆的表達。
細胞株質(zhì)控（1-2周）
- 單克隆擴大培養(yǎng)，凍存；
- 復蘇存活率檢測；
- 細菌真菌及支原體檢測。
宿主細胞檢測（1-2周）
- 細胞存活率檢測；
- 細胞數(shù)量檢測；
- 細菌真菌檢測；
- 支原體檢測。
報告基因表達質(zhì)粒構(gòu)建（2-3周）
- 密碼子優(yōu)化；
- 全基因合成；
- 構(gòu)建慢病毒表達質(zhì)粒。
瞬時轉(zhuǎn)染細胞（1-2周）
- 構(gòu)建好的報告基因表達質(zhì)粒瞬轉(zhuǎn)細胞。
Cell pool 篩選及功能活性驗證（1-2周）
- 陽性細胞篩選；
- Cell pool表達量檢測；
- 藥物誘導檢測信號通路。
單克隆篩選及驗證（7-10周）
- 單細胞進行鋪板，并驗證單克隆的表達。
細胞株質(zhì)控（1-2周）
- 單克隆擴大培養(yǎng)，凍存；
- 復蘇存活率檢測；
- 細菌真菌及支原體檢測。
客戶提供：
所需細胞株的靶點及宿主細胞信息
最終交付：
① Pool細胞或者單克隆細胞；
② 質(zhì)檢報告（COA）及項目結(jié)題報告。
