試劑盒所采用的抗原/抗體包被方式如何影響檢測的特異性與靈敏度？不同包被方式的適用靶點(diǎn)類型有何差異？?
日期：2025-11-10 15:54:45
包被方式通過改變抗原/抗體的結(jié)合效率、位點(diǎn)暴露狀態(tài)及非特異性反應(yīng)概率，直接影響檢測的特異性與靈敏度，且不同方式對靶點(diǎn)的結(jié)構(gòu)、豐度和性質(zhì)有明確適配傾向。
一、直接包被：簡單穩(wěn)定，適配高活性靶點(diǎn)
特異性：較高，無需中間結(jié)合步驟，減少了非特異性交叉反應(yīng)的發(fā)生。
靈敏度：中等，抗原/抗體直接固定在固相表面，部分結(jié)合位點(diǎn)可能被固相載體屏蔽，影響結(jié)合效率。
適用靶點(diǎn)：分子結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、活性易保持的抗原或抗體，比如純化的重組蛋白抗原、高純度單克隆抗體。
二、間接包被：信號放大，適配低豐度靶點(diǎn)
特異性：中等，引入二抗作為信號放大載體，二抗可能與樣本中其他成分發(fā)生非特異性結(jié)合，需嚴(yán)格篩選特異性二抗。
靈敏度：較高，單個一抗可結(jié)合多個攜帶標(biāo)記分子的二抗，實(shí)現(xiàn)信號放大，能檢出低濃度靶點(diǎn)。
適用靶點(diǎn)：豐度低的抗原、難以直接標(biāo)記的抗體，或需要強(qiáng)化信號的檢測場景，比如微量血清蛋白、低表達(dá)細(xì)胞因子。
三、捕獲包被：精準(zhǔn)富集，適配構(gòu)象敏感靶點(diǎn)
特異性：最高，采用雙抗體夾心模式，捕獲抗體與檢測抗體分別識別靶點(diǎn)的不同表位，僅對完整靶點(diǎn)分子產(chǎn)生特異性反應(yīng)。
靈敏度：高，捕獲抗體可高效富集樣本中的靶點(diǎn)，減少基質(zhì)干擾，結(jié)合信號放大效應(yīng)，檢測下限更低。
適用靶點(diǎn)：具有多個抗原表位的大分子抗原、易降解或構(gòu)象敏感的靶點(diǎn)，比如完整病毒顆粒、天然蛋白復(fù)合物、構(gòu)象依賴型抗原。
