用ELISA檢測試劑盒檢測高濃度樣本時,為什么需要進行梯度稀釋?
日期:2025-11-03 15:35:21
高濃度樣本需梯度稀釋,是為了讓檢測結(jié)果落在試劑盒的線性檢測范圍內(nèi),保證結(jié)果準(zhǔn)確、可靠且可重復(fù)。
核心原因
避免超出線性范圍,防止假低值。ELISA試劑盒的檢測信號與樣本濃度并非無限成正比,高濃度樣本會讓信號提前達到飽和,儀器無法區(qū)分濃度差異,最終顯示的數(shù)值偏低,即 “鉤狀效應(yīng)”。
減少基質(zhì)效應(yīng)干擾。高濃度樣本中可能含有的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)等雜質(zhì)會干擾抗原抗體結(jié)合,稀釋后能降低雜質(zhì)濃度,減少非特異性反應(yīng),提升檢測特異性。
確保結(jié)果可量化。梯度稀釋后,總有一個稀釋倍數(shù)能讓樣本濃度落入試劑盒的標(biāo)準(zhǔn)曲線區(qū)間,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出原始樣本的真實濃度,避免結(jié)果無法量化。







