ELISA檢測(cè)試劑盒中，酶標(biāo)記物HRP的作用是什么？
日期：2025-10-27 13:14:51
HRP是讓檢測(cè)結(jié)果從“看不見”變“看得見”的關(guān)鍵角色。酶標(biāo)記物HRP（辣根過氧化物酶）的核心作用，是將抗原與抗體的特異性結(jié)合反應(yīng)，轉(zhuǎn)化為可被觀察和定量的化學(xué)信號(hào)（通常是顏色變化）。
一、HRP的核心功能
信號(hào)放大：HRP本身不直接識(shí)別目標(biāo)物質(zhì)，而是被標(biāo)記在抗體（或抗原）上。當(dāng)抗體與目標(biāo)物質(zhì)結(jié)合后，一個(gè)HRP分子能催化多個(gè)底物分子發(fā)生反應(yīng)，將初始的微弱結(jié)合信號(hào)放大，讓低濃度的目標(biāo)物質(zhì)也能被檢測(cè)到。
信號(hào)轉(zhuǎn)化：在加入特定的底物（如TMB、OPD）后，HRP會(huì)催化底物發(fā)生氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生顏色變化。原本無法直接觀察的抗原抗體結(jié)合過程，通過這種顏色變化變得直觀可見。
定量依據(jù)：反應(yīng)產(chǎn)生的顏色深淺，與HRP的量直接相關(guān)，而HRP的量又與目標(biāo)物質(zhì)的量成比例。通過儀器（如酶標(biāo)儀）測(cè)量顏色的吸光度值，就能反向推算出樣本中目標(biāo)物質(zhì)的濃度。
二、HRP的工作流程（以雙抗體夾心法為例）
包被抗體先與樣本中的目標(biāo)抗原結(jié)合，形成“包被抗體-抗原”復(fù)合物。
標(biāo)記了HRP的檢測(cè)抗體再與上述復(fù)合物結(jié)合，形成“包被抗體-抗原-HRP標(biāo)記抗體”的三明治結(jié)構(gòu)。
加入底物后，HRP催化底物反應(yīng)，產(chǎn)生特定顏色。
通過觀察顏色或檢測(cè)吸光度，判斷是否存在目標(biāo)抗原及具體含量。
