酶聯(lián)免疫吸附法試劑盒原理和作用
日期：2023-07-03 16:12:58
酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）是常用的免疫學(xué)檢測方法，用于檢測特定抗原或抗體的存在和濃度。ELISA試劑盒是用于執(zhí)行ELISA實驗的一套化學(xué)試劑的組合。
ELISA試劑盒的原理是基于特異性抗原-抗體反應(yīng)和酶的催化作用。一般來說，ELISA試劑盒包括以下幾個步驟：
固定：將待測樣品中的目標分子（抗原或抗體）固定在試驗板的表面上。通常使用多孔板（如96孔板）作為固相。
捕獲：將與目標分子特異性反應(yīng)的捕獲抗體加入到孔中，與固定的目標分子形成抗原-抗體復(fù)合物。
檢測：加入與目標分子特異性結(jié)合的檢測抗體，形成二抗夾心復(fù)合物。檢測抗體上連接有特定的酶（如辣根過氧化物酶，HRP）。
反應(yīng)：加入底物（如TMB），酶催化底物發(fā)生變色反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測的信號。酶的活性與目標分子的濃度成正比。
檢測：利用吸光度計或熒光計等儀器，測量反應(yīng)產(chǎn)物的光吸收或熒光強度。根據(jù)標準曲線或參考樣品的信號值，可以確定待測樣品中目標分子的濃度。
ELISA試劑盒的作用是通過特異性的抗原-抗體反應(yīng)，檢測和定量目標分子（抗原或抗體）的存在。ELISA廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷中，例如檢測感染性疾病、腫瘤標志物、激素水平等。
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