蛋白質(zhì)純度測定方法
日期：2023-09-14 15:08:00
蛋白質(zhì)純度是指一個(gè)蛋白質(zhì)樣品中所含該蛋白質(zhì)的比例，通常用于評價(jià)蛋白質(zhì)制備和純化的質(zhì)量。以下是幾種常用的蛋白質(zhì)純度測定方法：
1、SDS-PAGE凝膠電泳分析：
SDS-PAGE凝膠電泳分析是一種常用的分離蛋白質(zhì)的方法，并可用于測定蛋白質(zhì)純度。該方法將蛋白質(zhì)經(jīng)SDS和還原劑處理后，按照電荷和分子量大小通過聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行分離。通過與分子量標(biāo)記物進(jìn)行比較，可以確定樣品中目標(biāo)蛋白質(zhì)的相對分子量和純度。
2、比濁度測定法：
在一定條件下，蛋白質(zhì)溶液中的蛋白質(zhì)分子可形成復(fù)合物而散射光線，這使得蛋白質(zhì)溶液的比濁度增大，通過比濁度值可定量測定蛋白質(zhì)濃度。然而，比濁度法不僅對樣品的純度要求極高，而且因?yàn)楸葷岫燃夹g(shù)無法對樣品中不同蛋白質(zhì)進(jìn)行區(qū)分，所以在測定混合物的純度時(shí)應(yīng)格外謹(jǐn)慎。
3、免疫印跡法：
該方法是一種將蛋白質(zhì)特異性結(jié)合于固相載體的隨后通過抗體探針定量檢測的方法，可用于檢測目標(biāo)蛋白質(zhì)的存在和純度。通過對待測樣品和標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較，可以定量檢測不同樣品中目標(biāo)蛋白質(zhì)含量的差異。該方法適用于大多數(shù)蛋白質(zhì)樣品，通常與其他蛋白質(zhì)純化方法結(jié)合使用，如柱層析、離子交換層析等。
在選擇蛋白質(zhì)純度測定方法時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求、樣品類型和儀器設(shè)備等因素綜合考慮。此外，不同方法的優(yōu)缺點(diǎn)也應(yīng)加以比較，以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
