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為什么wb內參條帶連在一起?

日期:2023-06-07 14:12:41


    WB內參(Western Blotting Internal Reference)通常用來作為Western blotting實驗的標準控制,以確保WB實驗的可重復性和準確性。WB內參條帶連在一起可能有以下幾個原因:
 
1、過載

    過載是指將樣品或標準品上樣過量導致條帶過寬過濃,甚至出現多個條帶,從而導致WB內參條帶連在一起。如果過載嚴重,WB內參條帶可能會與靶蛋白條帶重疊,影響結果的準確性。
 
2、沉淀不洗滌干凈

    Western blotting實驗中,溶液中可能存在著一些雜質或污染物,如果沉淀不洗滌干凈,這些雜質會導致WB內參條帶上出現多個細小的條帶或污染帶,從而影響實驗結果。
 
3、磁珠去除不徹底

    磁珠去除是Western blotting中的一個重要步驟,用于去除未結合的抗體和其他雜質。如果磁珠去除不徹底,未被去除的磁珠可能會在膜上形成細小的顆粒或線,從而導致WB內參條帶上出現多個細小的條帶或污染帶,影響實驗結果。


wb檢測

 
    Western blotting實驗中,蛋白質樣品的處理方式可能對WB內參條帶產生影響。例如,在提取蛋白質時,用不同的緩沖液或方法可能會導致WB內參條帶出現多個條帶或污染帶。此外,不同的蛋白質樣品可能具有不同的特性,如電泳遷移速率、尺寸和電荷等,這些因素也可能會導致WB內參條帶連在一起。
 
    為了避免WB內參條帶連在一起的情況,我們可以通過以下措施來減少這種情況的發(fā)生:
 
    1、精準的取樣量和洗滌步驟,以避免過載和污染。
 
    2、使用好的抗體,充分去除未結合的抗體和其他雜質。
 
    3、磁珠去除要徹底,避免磁珠殘留。
 
    4、在Western blotting實驗前,對蛋白質樣品進行充分的前處理和標準化。