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nf kappa b活性檢測細胞株實驗報告

日期:2023-03-27 09:50:14

    NF-κB是一種重要的轉錄因子,對于許多炎癥反應和免疫反應的調節起著關鍵作用。NF-κB的活性檢測可以用來評估某些化合物或細胞狀態對其調控的影響。以下是一份可能的NF-κB活性檢測細胞株實驗報告:
 
一、實驗目的
 
    評估化合物X對NF-κB活性的影響。
 
二、實驗設計
 
    使用HEK293細胞株(人胚腎細胞)進行實驗,細胞分為對照組和化合物X處理組。使用熒光素酶報告基因來檢測NF-κB活性的變化。
 
三、實驗方法
 
1.細胞培養
    將HEK293細胞株在37℃、5%CO2下培養至80-90%的密度,用DMEM培養基含10%胎牛血清(FBS)維持細胞生長。
 
2.細胞分組
    將HEK293細胞分為對照組和化合物X處理組,每組分為3個重復。對照組細胞只接受培養基處理,化合物X處理組細胞分別接受10、50和100μM的化合物X處理。
 
3.轉染
    在每組細胞中分別轉染熒光素酶報告基因及空載體。轉染后細胞在37℃、5%CO2下培養24小時,以確保熒光素酶基因轉染充分表達。
 
4.處理化合物
    將化合物X加入處理組細胞培養基中,分別處理10、50和100μM。
 
5.測量熒光素酶活性
    使用熒光素酶檢測試劑盒檢測各組細胞的熒光素酶活性,以反映NF-κB的活性變化。實驗數據以均值±標準差的形式呈現。
 
四、實驗結果
    對照組細胞熒光素酶活性為100 ± 5。與對照組相比,化合物X處理組細胞的熒光素酶活性顯著降低(P<0.05)。其中10、50和100μM處理組細胞的熒光素酶活性分別為60 ± 4、45 ± 3和35 ± 2。熒光素酶活性隨化合物X濃度的增加而下降,且差異均具有顯著性(P<0.05)。