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cd31(PECAM-1)抗體制備流程方法和應(yīng)用

日期:2023-08-16 10:45:04


    CD31(Cluster of Differentiation 31),也被稱(chēng)為PECAM-1(Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1),是細(xì)胞表面蛋白,主要表達(dá)在內(nèi)皮細(xì)胞中。它在血管內(nèi)皮細(xì)胞間起到細(xì)胞粘附和信號(hào)傳導(dǎo)的重要作用。以下是CD31抗體的制備流程方法和應(yīng)用:
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CD31抗體制備流程方法:
 
?    免疫原選擇:免疫原可以選擇純化的CD31蛋白或者含有CD31的細(xì)胞膜提取物。
 
免疫動(dòng)物選擇:常用的免疫動(dòng)物包括小鼠、兔子等。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇適合的免疫動(dòng)物。
 
?    免疫原注射:將選擇的免疫原與佐劑混合后注射到免疫動(dòng)物體內(nèi)。通常需要進(jìn)行多次免疫來(lái)增強(qiáng)免疫效果。
 
?    獲得免疫細(xì)胞:在注射一定次數(shù)后,從免疫動(dòng)物體內(nèi)獲取免疫細(xì)胞,如脾細(xì)胞或骨髓細(xì)胞。
 
?    融合細(xì)胞:將免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞融合,形成雜交瘤細(xì)胞。
 
?    篩選和克隆:通過(guò)培養(yǎng)基中添加選擇抗生素等方法篩選并進(jìn)行克隆,以獲得單克隆的CD31抗體產(chǎn)生的雜交瘤細(xì)胞。
 
?    抗體純化:采用親和層析、凝膠過(guò)濾等技術(shù)對(duì)CD31抗體進(jìn)行純化。
 
PECAM-1抗體的應(yīng)用:
 
?    IHC免疫組化(Immunohistochemistry):CD31抗體可以用于檢測(cè)和定位血管內(nèi)皮細(xì)胞,在組織切片中顯示血管分布情況。
 
?    ICC免疫細(xì)胞化學(xué)熒光染色(Immunocytochemistry):CD31抗體可以用于檢測(cè)和鑒定內(nèi)皮細(xì)胞及其衍生細(xì)胞。
 
?    WB免疫印跡(Western Blotting):CD31抗體可以用于檢測(cè)CD31蛋白在細(xì)胞或組織中的表達(dá)水平。
 
?    FC流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry):CD31抗體可以用于檢測(cè)血液中單個(gè)細(xì)胞表面的CD31蛋白,用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的鑒定和分類(lèi)。
 
    總的來(lái)說(shuō),CD31抗體的制備和應(yīng)用有助于研究血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和相關(guān)疾病,如血管發(fā)育、血管生成、心血管疾病等。