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抗體分離純化的原理

日期:2023-07-04 16:11:06

    抗體的分離純化原理主要依靠其特異性與抗原結合的親和作用。以下是常見的抗體分離純化方法及其原理:
 
    親和層析法:利用抗體與特定抗原結合的親和作用,將目標抗體選擇性地吸附在具有相應配體的固定相上,然后通過洗脫將目標抗體從固定相上解離下來。這種方法適用于多種規模和形式的樣品,可以選擇性地純化特定抗體。
 
    蛋白A/G/L親和層析法:蛋白A、蛋白G和蛋白L是常用的抗體親和層析材料。它們能夠與抗體的Fc區域或輕鏈結合,在一定條件下選擇性地吸附目標抗體,然后通過調整條件解離目標抗體進行純化。
 
    離子交換層析法:利用離子交換固定相,根據抗體與固定相之間的電荷差異,通過調整洗脫條件(如鹽濃度、pH值)使得抗體與固定相發生相互作用和解離,實現抗體的分離純化。
 
    凝膠過濾層析法:利用凝膠的孔隙大小來分離不同分子量的蛋白質,可以將目標抗體從其他小分子雜質中分離出來,并保留在凝膠上。
 
    電泳法:通過電場作用,根據抗體的電荷和分子量的不同,使其在凝膠電泳過程中發生遷移,并進行分離純化。
 
    這些方法可以根據實際需要和樣品特性進行選擇和組合使用,以達到對抗體的有效分離和純化。